紫外檢測(cè)器的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)普及
紫外檢測(cè)器是目前應(yīng)用較為廣泛的一種檢測(cè)器,這種檢測(cè)器靈敏度高,線性范圍寬,對(duì)流速和溫度變化不敏感,可用于梯度洗脫分離。要求被檢樣品組分在紫外或可見光區(qū)有吸收,而使用的流動(dòng)相無(wú)紫外吸收或紫外吸收波長(zhǎng)與被檢組分紫外吸收波長(zhǎng)不同,在被檢組分紫外吸收波長(zhǎng)處沒有吸收。屬選擇性檢測(cè)器,同時(shí)它是非破壞性檢測(cè)器。可以選擇樣品的大吸收波長(zhǎng)作為檢測(cè)波長(zhǎng),提高檢測(cè)靈敏度;也可選擇對(duì)溶質(zhì)有強(qiáng)吸收而基質(zhì)無(wú)吸收的波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè),有效提高分析的選擇性。梯度洗脫時(shí),選擇在流動(dòng)相改變而其吸光度不變的波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè),有利于建立高效、快速、穩(wěn)定的分析方法。
主要由光源、分光系統(tǒng)、檢測(cè)池和檢測(cè)系統(tǒng)四大部分組成,從光源分光系統(tǒng)得到的特定波長(zhǎng)的單色光通過檢測(cè)池時(shí),一部分光被溶液中的吸光性溶質(zhì)吸收,剩余的透射光到達(dá)檢測(cè)系統(tǒng)后光信號(hào)轉(zhuǎn)換成電信號(hào),再經(jīng)過電子線路放大等步驟,得到與待測(cè)吸光物質(zhì)濃度成正相關(guān)的輸出信號(hào)。
它是基于溶質(zhì)分子吸收紫外光的原理設(shè)計(jì)的檢測(cè)器,紫外檢測(cè)器的工作原理是當(dāng)一束單色光透過流動(dòng)池時(shí),若流動(dòng)相不吸收光,則吸收度A與吸光組分的濃度C和流動(dòng)池的光徑長(zhǎng)度L成正比。物理上測(cè)得物質(zhì)的透光率,然后取負(fù)對(duì)數(shù)得到吸收度。大部分常見有機(jī)物質(zhì)和部分無(wú)機(jī)物質(zhì)都具有紫外或可見光吸收基團(tuán),因而有較強(qiáng)的紫外或可見光吸收能力,因此既有較高的靈敏度,也有很廣泛的應(yīng)用范圍,是液相色譜中應(yīng)用較廣泛的檢測(cè)器。
為得到高的靈敏度,常選擇被測(cè)物質(zhì)能產(chǎn)生較大吸收的波長(zhǎng)作檢測(cè)波長(zhǎng),但為了選擇性或其它目的也可適當(dāng)犧牲靈敏度而選擇吸收稍弱的波長(zhǎng),另外,應(yīng)盡可能選擇在檢測(cè)波長(zhǎng)下沒有背景吸收的流動(dòng)相。紫外檢測(cè)器的波長(zhǎng)范圍是根據(jù)連續(xù)光源(氘燈)發(fā)出的光,通過狹縫、透鏡、光柵、反射鏡等光路組件形成單一波長(zhǎng)的平行光束。通過光柵的調(diào)節(jié)可得到不同波長(zhǎng)。波長(zhǎng)范圍應(yīng)該是根據(jù)光源來(lái)確定的,不同光源波長(zhǎng)范圍也不一樣。